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中檢維康iELisa嘔吐毒素檢測ELISA試劑盒
概要
嘔吐毒素也稱為脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON），是由串珠鐮刀菌、輪狀鐮刀菌以及多育鐮刀菌等產(chǎn)生的真菌毒素，大多存在于糧谷、飼料及其制品中。中毒后影響消化系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)，主要表現(xiàn)為嘔吐、頭痛、頭暈、腹痛、腹瀉等癥狀。我國標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：玉米、大麥、小麥及其制品中嘔吐毒素不得超過1mg/kg，豬、犢牛、泌乳期動(dòng)物配合飼料中嘔吐毒素不得超過1mg/kg，牛、家禽配合飼料中嘔吐毒素不得超過5mg/kg。
原理
測定的基礎(chǔ)是抗原-抗體反應(yīng)。微孔板上包被有抗抗體。加入嘔吐毒素（DON）標(biāo)準(zhǔn)品或樣品、酶標(biāo)抗原和抗體后，游離的嘔吐毒素與酶標(biāo)抗原競爭結(jié)合抗體，抗體或抗體結(jié)合物與固定在微孔板上的抗抗體再結(jié)合，沒有結(jié)合的標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)抗原及抗體被洗去，加入TMB底物顯藍(lán)色，加入終止液后顏色由藍(lán)變黃，用酶標(biāo)儀在450nm處檢測，吸光值與樣品中嘔吐毒素含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出嘔吐毒素的含量。
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試劑盒的組成
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包被有抗抗體的96微孔板：1塊（96 孔，12 條×8 孔）
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DON標(biāo)準(zhǔn)品：0ng/mL 、10ng/mL、40ng/mL、100ng/mL、250ng/mL 1 瓶 × 1.0mL
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DON抗體： 1 瓶 × 10mL
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DON酶標(biāo)抗原： 1 瓶 × 10mL
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10× 濃縮洗滌液： 1 瓶 × 50mL
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DON稀釋緩沖液A： 1 瓶 × 50mL
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DON稀釋緩沖液B： 1 瓶 × 50mL
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顯色底物TMB： 1 瓶 × 17mL
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終止液： 1 瓶 × 7mL
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試劑盒說明書： 1份
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質(zhì)檢報(bào)告： 1份
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需要的儀器、試劑
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儀器
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酶標(biāo)儀 450nm（iELisa全自動(dòng)酶標(biāo)儀或相當(dāng)者）
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微量移液器：20μL-200μL單道，100μL-1000μL單道, 50μL-300μL八道
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多功能旋轉(zhuǎn)混合器（或者搖床、高速均質(zhì)器）
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酶標(biāo)板振蕩器
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渦旋混合器
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離心機(jī)
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50mL離心管
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1.5mL離心管
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定性濾紙
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過濾漏斗
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天平：感量0.01g
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試劑
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純水（蒸餾水、去離子水）
適用樣品：谷物（玉米、小麥、大麥、大米、大豆），飼料（高靈敏度），飼料，發(fā)酵液，尿液樣品。
注意事項(xiàng)
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室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫（20- 25℃）會(huì)導(dǎo)致數(shù)值偏低。
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在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥過久的情況，則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板排干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
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標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和顯色液對(duì)光敏感，避免直接暴露在光線下。
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混合要均勻，洗板要*（包括加樣品和標(biāo)準(zhǔn)液的時(shí)候都必需充分混合均勻）。
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終止液為強(qiáng)酸性物質(zhì)，避免接觸皮膚。
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不要使用過了有效期的試劑盒，也不要混合使用不同批次的試劑盒，這樣會(huì)引起測定結(jié)果不準(zhǔn)確。
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試劑盒的儲(chǔ)存條件是2-8℃，切勿冷凍。
中檢維康iELisa嘔吐毒素檢測ELISA試劑盒
性能指標(biāo)
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檢測限LOD: 谷物0.15ppm（mg/kg），飼料0.25ppm（mg/kg），發(fā)酵液0.15ppm（mg/kg）,尿液0.05ppm（mg/kg）。（LOD：空白樣品測定值+2倍標(biāo)準(zhǔn)偏差SD）
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定量限LOQ: 谷物0.25ppm（mg/kg），飼料0.5ppm（mg/kg），發(fā)酵液0.25ppm（mg/kg）,尿液0.1ppm（mg/kg）。
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定量檢測范圍：谷物0.25-6.0ppm，飼料0.5-12.0ppm，發(fā)酵液0.25-6.0ppm,尿液0.1-1.0ppm。
